弧菌顯色平板的使用經(jīng)驗(yàn)分享
弧菌顯色平板是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，用于水產(chǎn)品及食物中毒樣品中弧菌特別是副溶血性弧菌的分離和鑒定。
檢驗(yàn)原理：
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源；蔗糖為可發(fā)酵的糖類；抑菌劑抑制大部分非弧菌細(xì)菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；混合色素與副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌所對(duì)應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團(tuán)，在淡黃色平板上產(chǎn)生品紅色菌落(副溶血性弧菌)和綠-藍(lán)綠色的菌落(霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌)。
弧菌顯色平板的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4.過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
弧菌顯色平板注意事項(xiàng)：
1.使用瓊脂糖需要加溫，請(qǐng)做好必要的防護(hù)措施，避免燙傷。
2.強(qiáng)烈建議您不要將瓊脂糖粉末直接倒入沸水中，這樣做會(huì)引起爆沸，濺出，致使?jié)舛认陆担€會(huì)造成結(jié)塊而融化困難。正確的做法是稱量一定量瓊脂糖至三角瓶中，根據(jù)配制濃度加入一定量的緩沖液(與電泳緩沖液)，加蓋硅膠塞（防止溫度差別造成表面結(jié)膜），微波或其他方式加熱至沸騰2分鐘左右，戴手套小心取出，搖勻，使之*溶解。
3.保證瓊脂糖*溶解，否則造成電泳條帶不清，保證*溶解的前提下，盡量縮短加熱時(shí)間。
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